①将冷冻管从液氮中取出，迅速投入37℃水浴融化，细胞融化后要尽快(约1min)移出37℃水浴。37℃水浴时间延长会提高细胞死亡率，复苏过程中一般细胞死亡率在20%～25%之间。
②迅速用酒精棉球擦拭冷冻管外部杀菌消毒，然后放置在冰浴上。
③小心开启瓶盖，把细胞转入含有4mL培养基的培养瓶中，然后把培养瓶移至培养箱，26℃～28℃培养1h，让细胞贴壁。
④细胞贴壁后，小心移弃培养基，主要是去掉DMSO(悬浮生长细胞要通过离心沉淀除去DMSO)、死细胞及其碎片，加5mL新鲜培养基，26℃～28℃培养。
⑤细胞培养24h后，更换新鲜培养基，继续培养直到形成单层，便可以传代。
⑥详细记录复苏细胞的名称、数量、复苏时间、存放部位等。
