1、培养皿通常使用固体培养基制成平板培养(就是平板皿名称的由来)，平板培养基制作是将已装好的灭菌琼脂培养基，用温水(无菌)溶化，取下试管棉花塞，管口于酒精灯火焰上通过，然后微启灭菌的培养皿盖，使试管口能深入为宜，倾入培养基后即可盖密，再轻轻地摇匀倾入的培养基，使之均匀地分布于皿底上凝结，即得平板培养基。
2、由于细菌的繁殖、发育生长是与所供给的培养基(营养)有直接关系，尤其是作定量检验分析，对提供营养物的多少，有决定意义。
3、细菌培养时对营养提供的多少、是否均匀，培养皿皿底是否平整极为重要，如培养皿皿底不平，琼脂的培养基分布将随培养皿皿底是否平整有厚有薄，薄的部分营养供给就不足，这对定量分析有着密切关系，故对定量培养皿皿底要求特别平整拜原因所在。但作一般定性(检验细菌、菌落生长、繁殖等)，使用普通培养皿即可。
4、注意事项：使用前经过清洁消毒，培养皿清洁与否对工作影响较大，可影响培养基的酸碱度，若有某些化学药品的存在，会抑制细菌生长。
使用前经过清洁消毒，培养皿清洁与否对工作影响较大，可影响培养基的酸碱度，若有某些化学药品的存在，会抑制细菌生长。
新购的培养皿应先用热水冲洗，再置于质量分数为1%或2%的盐酸溶液中浸泡数小时，使游离碱性物质除去，再用蒸馏水冲洗2次。
若要培养细菌，再用高压蒸气(一般6.8*10的5次方Pa高压蒸气)，120℃的温度下30min灭菌，置室温中干燥，或用干热灭菌，就是将培养皿置于烘箱内，温度控制在120℃左右的情况下维持2h，即可杀死细菌的胞牙。
经过消毒的培养皿才能接种培养使用。
2、使用方法：
把需要用到的试剂瓶放到工作区上合适的位置，并将即将要使用的试剂瓶盖子松开；
把培养皿放在工作区的中心；
拿掉试剂瓶的瓶盖，用吸管从试剂瓶中吸出试剂；
把培养皿的盖子放到培养皿后面；
轻轻地在培养皿一边的基底部直接注入培养基；
将培养皿的盖子盖上；
把培养皿放到原来放置的一侧，注意不要让培养基进入到盖子和底部只间的微小空间；
将用过的吸管取出。
