柠檬酸钠和Cu2+生成络合离子，此络合离子与葡萄糖中的醛基反应生成红黄色沉淀。
班氏试剂的配制方法
173克柠檬酸钠和100克无水碳酸钠溶解于800毫升水中。再取17.3克结晶硫酸铜溶解在100毫升水中，慢慢将此溶液加入上述溶液中，最后用水稀释到1升，当溶液不澄清时可过滤之。与还原糖反应加热生成红黄色沉淀。斐林试剂和本尼迪特试剂（班氏试剂）的区别： （1）其配方与斐林试剂不一样，其配方为：
①400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠；
②50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。制成溶液；
③把溶液倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
（2）其反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成Cu（OH）2，Cu（OH）2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而本尼迪特试剂中Cu（OH）2的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生OH-，与柠檬酸钠-碳酸钠溶液和CuSO4溶液混合时，Cu2+和OH-结合，生成Cu（OH）2，Cu（OH）2与还原糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。
（3）两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生Cu（OH）2，Cu（OH）2很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配；而本尼迪特试剂的配方中，柠檬酸钠-碳酸钠为一对缓冲物质，产生的OH-数量有限，与CuSO4溶液混合后产生的浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。
（4）本尼迪特试剂与斐林试剂只适用于还原性糖（如葡萄糖）的鉴定，不用于非还原性糖（如蔗糖）的鉴定。
当然，无论用本尼迪特试剂还是斐林试剂，归根
