区别在于与自己父亲的长幼关系上。
古时兄弟排序为:伯、仲、叔、季
伯伯:是父亲的哥哥，也是父亲戚友的尊称。
叔叔:是父亲的弟弟一，亦称跟父亲同辈，而年纪较小的男子。
伯伯和叔叔的区别：指代不同、用法不同、性质不同等。具体如下：
一、指代不同：
1、叔叔：古代词语中，称父亲的二弟为“叔父”，称父亲的弟媳为“叔母”，称丈夫的弟弟为“叔叔”。
2、伯伯：可以称比自己父亲年纪大的男性长辈，或对朋友父亲的尊称，如“世伯”。“伯伯”、“阿伯”亦是对一般中老年男性的称呼。
二、用法不同：
1、叔叔：称父亲的弟弟，女性对其丈夫的弟弟的称呼。
2、伯伯：一般叫父亲的哥哥， 伯伯是一个亲属称谓，指父亲的哥哥，也叫伯父或阿伯，或简称伯。古称从父。不过，“伯（bǎi）”也可以指大伯子，即丈夫的哥哥。伯父妻子称“伯姆”或“伯娘”或“伯母”。
三、性质不同：
1、叔叔：叔叔听起来年轻，如今在外面称呼年纪大的人为叔叔，叔叔已经成了一种敬称。
2、伯伯：称伯伯显得老，对于比自己父亲年纪大的人的礼貌称呼。
