无籽西瓜因制种复杂,严重影响了大田生产的发展。若采用无性繁殖途径,便能快速繁殖无籽西瓜的植株。其组织培养的技术要领为
1.种子组织培养的程序种子消毒、接种→芽的分化诱导→根的分化诱导。
(1)种子消毒、接种。取三倍体西瓜种子用 75%酒精浸泡1 分种,再用 0.1-0.2%升汞浸泡 30 分钟,再浸在无菌水中3-4 小时,待种子软化后,在无菌条件下,用镊子剥掉种皮,取 出种胚接到MS 基本培养基培养,待长出根和子叶后,将胚根剪掉,继续接种培养,促进芽的增殖及腋芽的萌动。
(2)芽的分化诱导。将带子叶的顶芽转移到诱芽培养基培养,即在MS 培养基中每升添加3 毫克 苄基嘌呤,使子叶叶腋间腋芽开始萌动,且与顶芽一起增殖,而在子叶基部形成芽丛,培养1 个月后,可形成约 10 个芽的芽丛。为扩大繁殖,可以不断用诱芽培养基培养。
(3)根的分化诱导。将诱芽培养基诱导产生的芽,切下再转移到生根培养基培养,即在MS 培养基中每升添加 0.2毫克吲哚乙酸,诱导产生根系,便逐渐形成完整的无籽西瓜试管苗。
2.器官组织培养。用无籽西瓜不同生育期的茎段,茎尖、叶片、叶柄、花柄、雌花、幼果等器官进行组织培养,均能获得愈伤组织,在适宜条件下,可以分化长成小植株,培养方法有两种:
(1)选用MS 培养基附加2.4D 和激素,使培养物产生愈伤组织,再将愈伤组织转移到附加萘乙酸的MS 培养基培养,促使根芽的分化逐渐形成完整的无籽西瓜试管苗。
(2)直接成苗培养。利用侧芽较粗壮的茎段,消毒后直接种在生根培养基培养,10 天后开始长出芽和根系,便可获得无籽西瓜试管苗。