①吸附法的优点:操作简便,条件温和,酶分子的构象很少或基本不发生变化,吸附剂可再生反复使用。
吸附法的缺点:酶和载体的吸附力比较弱,容易在不适宜的pH、高盐浓度、高底物浓度或高温条件下解吸脱落。 ②优点:用共价结合法制备的固定化酶,结合很牢固,酶不会脱落,可以连续使用较长时间。因此它是目前应用和报导得最多的一类方法。
缺点:但载体活化的操作复杂,反应条件也较激烈,往往要严格控制条件才能获得较高活力的固定化酶。同时共价结合时可能影响酶的空间构象而影响酶的催化活性。
③交联法(双功能试剂)交联法操作简便,但交联反应比较激烈,常会引起酶蛋白化学修饰而导致酶失活,酶回收率不高。
④包埋法(微胶囊法)包埋法由于酶本身一般不参与结合反应,因而比较安全。不过在化学聚合的过程中由于自由基的产生、放热以及酶和试剂间可能发生化学反应等,也往往可能导致酶失效,故在选择包埋方法和控制条件时仍须注意; ①必须注意维持酶的催化活性
②固定化酶应能回收贮藏,利于反复使用,所以酶与载体必须结合牢固。
③固定化应该有利于生产自动化、连续化。为此,用于固定化的载体必须有一定的机械强度,不能因机械搅拌而破碎或脱落。
④固定化酶应有最小的空间位阻,尽可能不妨碍酶与底物的接近,以提高产品的产量。 ⑤固定化酶应有最大的稳定性,所选载体不和底物、产物或反应液发生化学反应。 ⑥固定化酶应是廉价的,以利于工业使用。