乳酸菌的分离纯化
1、分离培养基采用MRS培养基, 分离培养基中添加溴甲酚紫作为指示剂;
采用稀释平板涂布法进行平板涂布分离, 挑取直径在115mm以下能使培养基中溴甲酚紫变红或变黄的单菌落, 菌落表面光滑的菌株，采用划线法进行分离纯化，获得纯种。
2、MRS 固体培养基：蛋白胨10g，肉膏10g，酵母提取物5g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，K2HPO4 2g，MnSO4·4H2O 0.25g，MgSO4·7H2O 0.58g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，琼脂25g，水1000mL。调pH6.2～6.4，1% CaCO3，121℃灭菌15min。
（1）分离纯化乳酸菌时，首先要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落，因此需要对泡菜滤液进行梯度稀释．
（2）在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为=（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×10 4 个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是平板划线法．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油．
