一代试管和二代试管在适应症上有多不同，一代试管婴儿技术更多是应用于女性不孕症上，帮助女性不孕患者开展助孕治疗。而试管婴儿技术则更多的是为男性不育患者开展治疗，例如严重的少弱畸精症、无精症等等。
而更主要的区别则在体外受精的操作上：一代试管婴儿和二代试管婴儿的体外受精过程是不一样的。
一代试管婴儿技术体外受精过程：夫妻双方的精子和卵子取出体外，在进行了处理之后，技术人员将精子和卵子一起放在培养皿中，使得精子和卵子自行受精形成受精卵。
二代试管婴儿技术体外受精的过程则完全是在人为操作下进行的，在夫妻双方的精子和卵子取出体外之后，技术人员直接在显微镜下挑选一条极细的精子注入到卵子当中，迫使卵子受精，形成受精卵。
