金属硫蛋白(Metallothioneins;MT) 概述 按1985年MT命名委员会规定,凡符合下列特征的多肽,可称之为MT: ① 低相对分子质量(6000~7000); ② 高金属含量(每分子含金属原子7~12个); ③ 特征氨基酸组成(半胱氨酸含量占23%~33%,不含芳香族氨基酸和组氨酸); ④ 独特的氨基酸序列结构(半胱氨酸残基的分布有特征性,如Cys-X-CyS,X为除CyS以外的氨基酸残基); ⑤ 具有金属硫醇盐的光谱特征; ⑥ 具有金属硫醇簇结构。
存在 哺乳动物、鱼类、某些微生物和植物均广泛存在,含量最多的是脏器,特别是马肾。人的肝脏中主要含Zn-MT,而肾脏则以Cd-MT为主。性状 白色或淡黄色粉状物质,平均相对分子质量6500。得自哺乳动物的MT一般含61个氨基酸残基,其中20个为半胱氨酸(CyS),半胱氨酸残基上的硫基能结合7个金属离子。通过硫酯键与Cd2+、Zn2+、Cu2+、Hg2+、Ag+等金属离子结合。使MT中金属离子完全解离的pH值,Cd-MT为2,Zn-MT为3,Cu-MT需在0.5mol/L的HCl中才能完全解离。它们的特征吸收峰分别为Cd-MT为254nm,Zn-MT为220nm,Cu-MT为270nm。有很强的抗热变性和抗蛋白酶消化作用。生理功能 1. 具有很强的抗辐射作用,以保护细胞不受损伤,并能修复已受到损伤的细胞功能。如用含有MT的培养基培养细胞,然后置紫外线下照射一定时间,不含MT的存活率不到50%,而含MT的细胞存活率达82.7%。且其半衰期长,肾脏中的Cd-MT半衰期为4.5d,而目前普遍用于抗辐射的半胱氨酸仅几个小时。2. 有很强的抗氧化和消除 、OH·自由基的能力,是有效的细胞保护剂,避免不饱和脂肪的氧化,有一定延缓衰老和辅助抑制肿瘤等作用。曾以低(0.33mg/kg)、中(0.67mg/kg)、高(1.00mg/kg)三个剂量的Zn-MT饲喂10个月龄的昆明小鼠,结果低剂量组能提高肝脏SOD活力9%(P<0.05);中剂量组能提高谷胱甘肽过氧化物酶活力10%(P<0.05),降低肝脏过氧化脂质18%(P<0.05),提高肝脏SOD活力14%(P<0.01);高剂量组能提高小鼠谷胱甘肽过氧化酶活力15%(P<0.01),降低肝脏过氧化脂质18%(P<0.05),降低心肌脂褐质含量90%(P<0.05)。表明MT清除OH·自由基的能力是GSH-Px的100倍,为SOD的1000倍,而OH·自由基是体内危害最大的一类自由基。3. 参与体内金属元素的代谢和调节,平衡机体金属离子,防止肌体中金属离子的过多或过少而导致的病变。并能促进重金属排出体外,防止铅、镉、汞、锌的中毒。4. 通过强大的清除自由基和抗辐射能力,保证皮肤的营养供应和代谢,防止色素沉着,以起到真正的美容护肤作用。5. 增强免疫作用。曾以3.3μg/kg的Zn-NT饲养2月龄的昆明小鼠,测定各项免疫指标。结果能提高小鼠胸腺/体重17%(P<0.05),提高足趾(跖)肿胀厚度15%(P<0.001)和碳廓清吞噬指数19%(P<0.05)。制法 按10~80mg/kg的量给家兔(或羊)注射ZnCl2进行富锌诱导期约8天,注射量逐步增加。然后取出富锌诱导的肝脏用生理盐水清洗后,加入预冷的乙醇液进行低温组织匀浆,用冷冻高速连续离心机分离,上清液滴加预冷的无水乙醇,至乙醇浓度至75%,静置后离心分离得沉淀物,用缓冲液溶解,除去上清液得乙醇粗提物,经柱层析,再洗脱分离,收集第二个无色峰即为含盐的金属硫蛋白,再经超滤浓缩脱盐后冻干而成。此外,也有用酿酒酵母中选育出MT菌株,进行发酵、提取的方法。安全性 1. LD50>10g/kg。2. 致突变试验(Ames试验,微核及精子畸形试验)阴性。3. 亚慢性毒性试验:阴性。