1. 开盖。根据指示，提起保险销，转动手轮，打开锅盖。
2. 通电。接通与灭菌器标示一致的电源，将控制面板的电源开关开至ON处，面板低水位灯亮，设备报警，显示锅内缺水。
3. 加水。关闭排汽阀，将纯化水注入灭菌器内，至高水位灯亮，设备停止报警，观察灭菌器灭菌室，当加水过多存水时，打开排汽阀，旋至排水位置，排出多余水量。
4. 堆放。将包扎的灭菌物品放入灭菌器灭菌室中，物品放置留有间隙，依次放入灭菌室内，有利于蒸汽穿透，安全阀排汽口位置必须留出空隙，保障其通畅放汽，防止因放汽阀堵塞未能泄压，造成锅体爆裂事故。
5. 密封。将锅盖放下，将手轮按指示旋转到底，直至无法转动，此时密封开关处于接通状态，关盖完成。
6. 设定温度与时间。灭菌培养基时，应根据培养基的特性，设定不同的灭菌时间与温度，需注意，不同培养基灭菌温度与时间不同，不能共同灭菌（不同型号的灭菌器，调节温度与时间的步骤不同，需根据说明书进行调节）。
7. 灭菌。当温度与时间设定完毕后，点击“开始键”进行灭菌，此时灭菌器处于锁定状态。（自动型灭菌器需保证冷却水量充足，无需手动排汽；手动型灭菌器，在灭菌初始，需打开排汽阀，排汽，此举利于灭菌室温度均衡，升温至105℃左右时，关闭排汽阀，静等灭菌器加热升温与保温）。灭菌结束后，灭菌器报警，此时关闭灭菌器。
8. 干燥。灭菌结束后，固体物料可手动打开排汽阀，泄压，降温，开锅，取出灭菌物料；液体物料严禁手动排汽降压降温，只能等至灭菌器自然降压、降温后取出，防止液体爆沸，飞溅。
9. 开盖。提起保险销，打开锅盖，取出灭菌物料。需注意，开盖时，设备灭菌室内温度高，蒸汽充足，防止高温锅体与蒸汽烫伤；取物料时应佩戴防烫手套，防止高温烫伤，同时防止应激反应而污染或摔碎物料
