1、成熟亲鱼的培育
泥鳅2龄性成熟，用于繁殖的亲鱼最好达3龄以上，雌泥鳅体长22厘米以上，体重14克以上，腹部膨大饱满，能看到卵巢轮廓。雄鱼体长在12厘米以上，体质健壮，性腺发育良好。雌、雄亲鳅比例为2∶1，分开培育。
采取驯化投饵的方法，强化培育亲鳅。主要投喂鱼粉、猪血粉及剁碎的动物内脏等饲料，辅助少量米糠、麸皮、豆渣、蔬菜屑等植物性饲料。
注意水质调节，确保亲鱼性腺的发育。轻压雌鱼腹部即可排除卵粒。卵呈米黄色，半透明，有粘着力为成熟好的卵，轻压雄鱼腹部即有乳白色精液排出，属成熟好的雄鱼。
2、掌握好人工催情时间
北方应于5月中旬，水温升至18℃左右时催情，每尾雌泥鳅用鲤鱼或鲫鱼脑垂体一个或绒毛膜促性腺激素300~400国际单位。雄泥鳅用量减半。做法是把所需的脑垂体或激素配在一定量的林格氏液，其配制方法是在1升蒸馏水中溶入氯化钠7.5克，氯化钾0.2克，氯化钙0.4克中。每尾雌泥鳅注射脑垂体0.1毫升或激素0.2毫升。
亲鱼注射后，雌、雄按1:1配组放入产卵池中。因为泥鳅体表粘液多，身体滑，所以注射催情药物前要对泥鳅进行处理。用可卡因0.1克溶于50升水中配成麻醉液，泥鳅在麻醉液中经2~3分钟被麻醉后注射催情药物。
也可用毛巾将泥鳅包住掀开毛巾一角，使泥鳅肚皮露出，在腹鳍前约1厘米处避开正中线部位，从后向前入针，针刺要防止刺伤内脏，动作要迅速、准确，注射时间一般选在傍晚，从注射到顺利产卵，水温20℃时效应时间为15小时。
3、进行人工授精
人工催情后，14~18小时内，进行人工授精，授精后卵粘着在鱼巢上，鱼巢可以放在不同的容器中孵化。孵化水深为10~25厘米，静水流水都可以，但要保持水质清新。
因受精卵的粘着力弱，容易脱落，所以应该注意防止孵化用水急剧冲刷波动，水流量的大小在孵化池内以不冲走仔鱼为准，在孵化缸和孵化槽内以能使卵翻动为好。净水孵化每天要换水2次，孵化量以每10升水中放入5 000粒受精卵为最佳。
在水温19~23℃时多数受精卵经26小时左右即可全部孵出鱼苗。3天后，卵黄囊消失时，要及时转入池塘中饲养。
