培养胃宝最好使用玻璃容器。原料是茶水加糖。茶叶用红茶、绿茶、花茶均可，葡萄糖培养红茶菌生长最快。糖、茶、水的重要比例是5:0.1～0.4:100。配制过程是先用开水沏茶，趁热把糖溶化于其中，等茶水凉后再滤去茶叶，茶水温度降至30℃时就可接种。
首次培养红休菌菌种需购买。 菌液和菌膜都可以作为菌种，最好是二者同时作菌种。菌液与培养液按1:4的比例在培养容器中混合均匀，接种完毕，放在无阳光直射的地方，在28℃左右的温度下静止培养，不要动它，使温度维持在25～32℃之间，不可过高或过低，这样才能使胃宝在10天成熟。
