1、超低温甘油保存法：将铜绿菌接种于无菌肉汤中，在37℃恒温培养箱培养18小时后，加人无菌甘油，使甘油最终浓度为15%，充分混匀，吸取1ml分装于无菌的冷冻管或1.5ml离心管，封好盖子，在-20℃冰箱中放置3小时后,置-70℃冰箱中长期保存。
铜绿菌菌种复苏，从-70℃冰箱中取出一只菌种保存管，迅速用接种环轻轻刮取几下，转种于已预温到37℃的普通琼脂平板上,37℃培养18-24小时。
2、半固体保存法：用接种针挑取少量铜绿菌菌苔移种于无菌半固体培养管,肉汤中加人琼脂粉，浓度为0.25%,于37℃培养18小时，用无菌方法将培养管的软木塞，换为灭菌的橡胶塞后,放入铜绿菌菌种保存箱 4℃保存。
