有4位皇后，分别为：
孝洁陈皇后
孝洁肃皇后(1508年-1528年)陈氏，明世宗朱厚熜第一任皇后，元城(今河北省大名县一带)人。孝洁陈皇后是明朝皇帝朱厚熜的皇后。
张皇后（废后）
张皇后(-1537年)，明世宗朱厚熜第二任皇后，后被废。张皇后（废后）是明朝皇帝朱厚熜的皇后。
孝烈方皇后
孝烈皇后(1500?-1547)方氏，明世宗嘉靖帝第三位皇后，江宁(今南京)人。嘉靖十三年，张皇后被废，方氏被立为皇后，沈氏封为宸妃，阎氏为丽妃。嘉靖二十一年(1542年)，宫女杨金英等谋逆，刺杀嘉靖皇帝，嘉靖皇帝全依赖方皇后才没有受害。嘉靖二十六年(1547年)孝烈方皇后是病死的，而不是野史中的被火烧死。孝烈方皇后是明朝皇帝朱厚熜的皇后。
孝恪杜皇后
孝恪皇后杜氏(?-1554年)，明世宗朱厚熜嫔妃，明穆宗朱载坖生母。
其子朱载坖即位后，为杜氏恭上谥号孝恪渊纯慈懿恭顺赞天开圣皇后，并迁葬永陵，设牌位于神霄殿。
